Диастазная активность бывает низкая у некоторых видов натурального меда (белоакациевый, кипрейный, клеверный, липовый, подсолнечниковый). При нагревании меда свыше 50° и длительном хранении (более года) диастаза частично или полностью инактивируется. Фальсификация меда также ведет к ослаблению активности фермента.
Определение активности диастазы основано на способности этого фермента расщеплять крахмал на амилодекстрины. Количественно активность диастазы выражается диастазными числами (ед. Готе), которые обозначают количество 1%-ного раствора крахмала (в мл), расщепляемого диастазой (амилазой), и содержатся в 1 г меда (в пересчете на сухие вещества) в течение 1 ч при температуре 40 ± 1° до веществ, не окрашиваемых йодом в синий цвет.
Для определения диастазной активности в 11 пробирок разливают 10%-ный раствор меда и другие компоненты, предусмотренные правилами ветеринарно-санитарной экспертизы меда.
Компоненты и их количество в каждой пробирке при исследовании диастазного числа:
Компоненты |
Номера пробирок |
||||||||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
|
10%-ный раствор меда, мл |
1,0 |
1,3 |
1,7 |
2,1 |
2,8 |
3,6 |
4,6 |
6,0 |
7,7 |
11,1 |
15 |
дистиллированная вода, мл |
9,0 |
8,7 |
8,3 |
7,9 |
7,2 |
6,4 |
5,4 |
4,0 |
2,3 |
- |
- |
0,58%-ный раствор поваренной соли, мг |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
1%-ный раствор крахмала, мг |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
Диастазное число (ед. Готе) |
50 |
38 |
29,4 |
23,8 |
17,9 |
13,9 |
10,9 |
8,0 |
6,5 |
4,4 |
3,3 |
Пробирки закрывают пробками, тщательно перемешивают и помещают в водяную баню на 1 ч при температуре 40 ±1°. Затем их вынимают из водяной бани и охлаждают под струей воды до комнатной температуры, после чего в каждую пробирку добавляют по одной капле раствора йода (0,5 г йода и 1 г йодистого калия растворить в 100 мл дистиллированной воды). В тех пробирках, где крахмал остался неразложенным, появляется синяя окраска, при отсутствии крахмала - темноватая, с частичным разложением - фиолетовая. Последняя слабоокрашенная пробирка перед рядом обесцвеченных (с желтоватым оттенком) соответствует диастазной активности испытуемого меда.
Растворимый крахмал можно приготовить следующим способом: 250 г картофельного крахмала промывают в 1 л дистиллированной воды, после отстоя воду сливают. В осадок заливают 1,5 л 4%-ного раствора соляной кислоты и выдерживают 1-2 ч, затем смесь фильтруют. Крахмал, собранный с фильтра, многократно промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции по лакмусу и высушивают при температуре 90°.
В связи с тем что диастазное число натурального меда зависит от зоны сбора нектара, его устанавливают на месте. Во всех случаях диастазное число меда не должно быть ниже 5.